Convertido en un agente de la Liga Anti Villanos, Gru combate el crimen acompañado de su esposa Lucy. Después de frustrar el robo del diamante más caro del mundo, Gru es incapaz de capturar al perpetrador, el supervillano conocido como Balthazar Bratt. Ante esto, la directora de la agencia, Valerie Da Vinci, ha tomado la decisión de despedir a ambos. La situación lleva a Gru y a Lucy a pasar por diferentes complicaciones. Lucy se enfrenta a su nuevo papel como madre de Margo, Edith y Agnes, mientras que Gru lucha contra sus impulsos de regresar a ser el supervillano que todos conocían y temían. Las cosas llegan al extremo cuando Gru descubre la existencia de un hermano gemelo, Dru, un carismático multimillonario, quien en el fondo desea formar un dúo de malhechores con el propio Gru. No sólo eso, los minions han sido arrestados y Balthazar ha conseguido robar el diamante, el cual necesita para activar un robot gigante, para destruir Hollywood y cobrar venganza. Sólo Gru es capaz de detenerlo, pero ahora ni siquiera él esta seguro de querer hacerlo.
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