Tim Guinee asistió a Houston High School for Performing Arts y comenzó una compañía de teatro en Houston antes de mudarse a Nueva York para estudiar en la Academia Americana de Artes Dramáticas. Después asistió a la Escuela de Artes de la Universidad de Carolina del Norte en Winston-Salem, donde se graduó y tuvo su debut cinematográfico en la cinta de aventura Tai-Pan (1986). En 2005 protagonizó como el productor discográfico Sam Phillips en la miniserie ganadora del Globo de oro Elvis, y en los años consecutivos fue parte del elenco habitual en Lie to me, Hell on Wheels, Elementary, The good wife y Homeland. En la pantalla grande, Guinee apareció en cintas como Blade: cazador de vampiros (1998), Brigada 49 (2004), Iron Man (2008), Iron Man 2 (2010), Agua para elefantes (2011) y Regresa a mí (2018). Se ha anunciado que Guinee formará parte del elenco de la cinta biográfica Harriet (2019), dirigida por Kasi Lemmons.
