Ayesha Dharker hizo su debut en la pantalla en la película de François Villiers de 1989 Manika, une vie plus tard. Posteriormente pasó a protagonizar muchas películas estadounidenses, francesas e indias. Interpretó a una joven convertida en una terrorista suicida en la película tamil The Terrorist (1998), por la que recibió el premio a la Mejor Contribución Artística de una Actriz en el Festival Internacional de Cine de El Cairo y nominada a un Premio Nacional de Cine a la Mejor Actriz. Su papel más reconocido internacionalmente llegó en 2002 cuando interpretó a la reina Jamillia, la reina de Naboo, en Star Wars: Episodio II - El ataque de los clones. En 2008, apareció en el episodio "Planet of the Ood" de la serie de televisión de ciencia ficción de la BBC, Doctor Who, como Solana Mercurio. En 2020, Dharker tuvo un papel en la cinta nominada el Oscar de Florian Zeller El padre como la doctora Sarai.