Liza Colón-Zayas comenzó su carrera protagonizando producciones Off-Broadway. Ganó gran reconocimiento cuando escribió, produjo y protagonizó un espectáculo para una mujer titulado Sistah Supreme, una obra semiautobiográfica en la que narra el crecimiento de una mujer latina en Nueva York durante los años setenta y ochenta. Enfocada en una carrera teatral, Colón-Zayas también apareció en series de televisión como Sex and the City, La ley y el orden: Unidad de Víctimas Especiales. Ella actuó como invitada en Dexter (temporada 5, episodios 7 y 8), como una soplona de los detectives que investigan los "asesinatos de Santa Muerte". En la pantalla grande, interpretó a un pasajero en la película Vuelo 93 (2006) y a la jueza Angel Rodriguez en Frente a frente (2008). Interpretó a Dawn en la película de terror 12 horas para sobrevivir: el año de la elección (2016). En 2020 formó parte del elenco principal del thriller de Joe Wright, La mujer en la ventana.