Cole Sprouse comenzó su carrera junto con su hermano gemelo, Dylan, a los seis meses de edad. De 1993 a 1998 los gemelos interpretaron el papel de Patrick Kelly en la serie de comedia Grace under fire. Al año siguiente de que terminara a serie, Cole fue elegido para protagonizar en el papel de Julian, junto a Adam Sandler en la exitosa comedia Un papá genial (1999) y tuvo una participación en la película de misterio The Astronaut’s Wife (1999), protagonizada por Johnny Depp y Charlize Theron; en ambos trabajos seguía compartiendo papel con su hermano. El primer papel en el que Cole trabajó sin su hermano fue el de Ben Gellar, hijo de Ross en la serie Friends, pero volvieron a compartir personaje en el drama The heart is deceitful above all things (2004). Desde 2005, Cole y Dylan protagonizaron las series de Disney Channel, Zack y Cody: Gemelos en acción y Zack y Cody: gemelos a bordo. En el 2011, Cole decidió dejar la actuación de lado para estudiar la universidad, pero tras graduarse fue elegido para el papel de Jughead en la serie Riverdale. Volverá a la pantalla grande en el drama romántico Five Feet Apart (2019).